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抑菌试验全攻略:操作步骤与注意事项 抑菌试验1:平板计数法 操作步骤:将一定量的稀释样品涂布在平板上,形成肉眼可见的单菌落,并统计单菌落数。根据稀释倍数和取样接种量换算出样品中的含菌数。通过与组内或组间比较,得到样品对待测菌株的抗菌性能。 适用范围: 固体类:薄膜、金属块、镀膜玻璃等,测试面积需大于等于1.5㗱.5cm,大于该面积按比例添加菌液。 液体类:样品量根据测试时样本的溶剂和浓度而定,浓度一般不超过菌液的10%。 结果判定:进行3个重复实验计算平均值。 抑菌试验2:抑菌圈实验 操作步骤:抑菌圈实验是测定抗菌性能的常用方法,主要用于测定样品对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用。主要方法包括K-B法、打孔法和牛津杯法。 适用范围: 固体类:薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等。制样要求:金属块、凝胶类样本须制备成统一大小的圆形。布料、纸片类样本可裁剪为圆形。若样品太脆无法裁剪,可称取相应质量样品,用PBS浸泡过夜,制备成圆形药敏片。 液体类:根据测试时样本浓度而定,一般为1 mL/种菌。 粉末类:使用打孔器进行打孔,用粉末填充满所打的孔中,一般最少需要1g粉末样品。 结果判定:每个抑菌圈测量三次计算平均值。 抑菌试验3:OD值测定 操作步骤:将待测样品与菌液共培养后,细菌生长的培养液浊度与细菌浓度成正比,使用紫外分光光度计测定培养液的OD值。 适用范围: 固体类:薄膜、布料、金属块、纸片、凝胶等。 液体类:要求样本溶液无色或者淡色。 结果判定:绘制生长时间与OD值的生长曲线图,每个点测量3次OD值。 抑菌试验4:MIC值 操作步骤:最低抑菌浓度(MIC):能够抑制培养基内细菌生长的最低药物浓度。 适用范围: 液体类:样品溶液需完全溶解且无色或者淡色,使用微孔板法。 粉末类:粉末必须可溶,根据CLSI标准,最大母液浓度512ug/ml。 结果判定:MIC结果为肉眼可见无细菌生长的最小浓度,需进行三次重复实验。 堥ꌦ事项: 培养基配置:要求培养基灭菌温度不宜过高,培养基含糖量也不能太高,否则会导致焦化,影响实验结果判断。 常规菌株:一般不需要设置抗生素对照组。
留学生雅思8分陪练的卷王之路 1⃣️ Yike 硕士:帝国理工大学政治经济学 本科:华威大学 雅思总分:8分 听力:满分9分,阅读:8.5分 写作:7分,口语:7分 从高中开始在英国留学,拥有长达6年的英国学习和生活经验 ﹨𝧚日常生活和学术环境非常了解,洞悉雅思考试规则 2⃣️ Cho 硕士:北京大学经济学专业 本科:瑞士洛桑酒店管理学院(酒店管理全球top1) 雅思总分:8.5分 听力阅读:满分9分 口语和写作:7.5分 帮助2名学生雅思口语从6分到7分 帮助1名学生通过清华大学研究生英文面试 曾经就职于顶级投行,擅长商务英语 3⃣️ Frances 硕士:香港大学同声传译专业 雅思总分:8分 听力阅读:满分9分 口语和写作:7分 京师范大学中国教育创新研究院/高等教育研究院实习经历 堦 任国家社科基金中华学术外译项目翻译工作 CATTI英语口译三级 英语专业八级、英语专业四级 BEC剑桥商务英语高级 国才英语高级 4⃣️ Bruce 本科:帝国理工大学在读 雅思总分:8分 堥쥊阅读:满分9分 写作口语:7分 全额奖学金被英国高中录取 熟悉国际体系和英国本土体系课程 IGCSE数学、物理、化学满分 Alevel数学、进阶数学、物理、化学A* 多次参加英语演讲比赛 多次获得牛津杯省级、国家级一等奖
考马斯亮蓝法,测蛋白! 实验目的 掌握考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的原理和方法。 젥ꌥ理 考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水区域结合,这种结合具有高敏感性。考马斯亮蓝G-250的磷酸缓冲液呈棕红色,最大吸收峰在450nm。当它与蛋白质结合后,形成强色复合物,最大吸收峰变为595nm。在一定范围内,考马斯亮蓝500与蛋白质结合后,在595nm处的吸光度与蛋白质浓度呈线性关系,因此可以用于蛋白质浓度的定量测定。 ꠥꌥ覝 试管(5cmx15cm,8支) 移液器(0~1000) 牛津杯 擦镜纸 比色皿(4支) 实验日期 年月日 实验步骤 取一支净试管,加入样品液100及考马斯亮蓝染液500,混合均匀。 将试管静置3分钟,于595nm处比色,记录样品液的吸光度。 根据标准曲线求出样品中的蛋白质浓度。 实验结果 样品1:浓度为67/mL 样品2:浓度为345/mL 样品3:浓度为500/mL 实验讨论 实验中应注意避免去污剂、SDS等干扰物的影响,且应在30分钟内完成比色测定。时间放置过长可能导致考马斯亮蓝与蛋白质的复合物沉淀。 实验总结 考马斯亮蓝法是一种灵敏度高、操作简便的蛋白质浓度测定方法。但在实验过程中需注意避免干扰物的影响,并在规定时间内完成比色测定。 实验思考题 利用其他方法测定蛋白质浓度的优缺点是什么? 考马斯亮蓝法与其他方法的比较如何? 实验报告 江西科技师范大学实验报告 年级班号: 同组姓名: 实验日期:年月日 成绩: 指导老师:
研一实验室平板抑菌圈实验:牛津杯法详解 实验中遇到的问题: 菌液浓度是否过高? 抑菌样品液的浓度是否过低? 阳性药浓度选择是否合适? 是否形成了明显的抑菌圈? 实验步骤: 倒平板方法:采用双层琼脂打孔法,将菌液与琼脂培养基按1:10的比例混合,菌浓度为2.25*10^7cfu/ml,然后倒入平板。 孔内样品:孔1~4为样品组,孔5为空白溶剂,孔6为阳性对照(每孔加样量200ul)。 最后一张图:对阳性药浓度进行了简单的筛选。 通过这些步骤,我们可以更深入地了解抑菌圈实验的原理和方法,从而更好地进行实验设计和数据分析。
ꦊ菌圈实验:牛津杯法详解䊧津杯法,也被称为管碟法,是一种利用双层琼脂进行抑菌圈实验的方法。虽然操作稍显复杂,但结果准确可靠。今天,我们将来介绍一种更简便的单层琼脂牛津杯法。 首先,准备好菌悬液,浓度控制在1.0㗱0^7-8CFU/mL。你可以使用生理盐水、PBS或液体培养基进行稀释。接下来,在琼脂板背面做好标记,并用100的菌悬液均匀涂布于平板上。之后,将含菌平板放入框子中,便于后续操作。牛津杯经过灭菌并烘干后,用镊子轻轻放置在含菌平板上,并注入100-150的样品。同时,以溶解样品的溶剂作为空白对照。䊊最后,盖上培养皿盖子,并将框子置于37℃的恒温培养箱中培养16-20小时。培养结束后,用镊子取出牛津杯,倒置平板,采用十字交叉法测量抑菌圈的直径。 通过这种方法,你可以有效地评估样品的抑菌效果,为科研工作提供有力支持!ꀀ
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